Сперматозоид под микроскопом. Камера маклера


Эмбриологический атлас. Спермограмма.

соавтор Гвоздюкова ЕкатеринаМинимальные референсные значения показателей эякулята
 Показатель Минимальноезначение
 Объем эякулята (мл) 1,5 (1,4-1,7)
 Общее количество сперматозоидов в эякулята (1х6 на эякулят) 3,9 (33-46)
 Концентрация сперматозоидов (10х6 на мл) 15 (12-16)
 Общая подвижность (PR+NP, %) 40 (38-42)
 Прогрессивно подвижные (PR, %) 32 (31-34)
 Жизнеспособность (живые сперматозоиды,%) 58 (55-63)
 Морфология сперматозоидов (нормальные формы, %) 4 (3-4)
  
 Остальные показатели эякулята 
 pH > 7,1
 Пероксидаза-положительные лейкоциты (10х6 на мл) < 1,0
 Mar-тест (подвижные сперматозоиды со связанными шариками, %) < 50
 Тест с иммунными шариками (подвижные сперматозоиды со связанными шариками) < 50
 Содержание цинка в семенной плазме (мкмоль/эякулят) > 2,3
 Содержание фруктозы в семенной плазме (мкмоль/эякулят) > 12
 Содержание нейтральной глюкозы в семенной плазме (мЕд/эякулят) > 19

Классификация показателей эякулята

 Аспермия Отсутствие эякулята (или ретроградная эякуляция)
 Астенозооспермия Процент прогрессивно-подвижных сперматозоидов (PR) ниже нормативных значений
 Астенотератозооспермия  Процент прогрессивно-подвижных (PR), так и морфологически нормальных сперматозоидов ниже нормативных значений 
 Азооспермия Сперматозоиды в эякуляте отсутствуют
 Гемоспермия (гематоспермия) Присутствие эритроцитов в эякуляте
 Криптозооспермия Сперматозоиды отсутствуют в нативном препарате, но присутствуют в осадке эякулята после центрифугирования
 Лейкоспермия (лейкоцитоспермия, пиоспермия) Присутствие лейкоцитов в эякуляте выше нормативных значений
 Некрозооспермия Низкой процент живых и высокий процент неподвижных сперматозоидов в эякуляте
 Нормозооспермия Общее число (или концентрация) сперматозоидов и процент прогрессивно-подвижных (PR) и морфологически нормальных сперматозоидов равно или выше нормативных значений
 Олигоастенозооспермия Общее число (или концентрация) и процент прогрессивно-подвижных (PR) сперматозоидов ниже нормативных значений
 Олигоастенотератозооспермия Общее число (или концентрация) сперматозоидов и процент как прогрессивно-подвижных (PR) так и морфологически-нормальных сперматозоидов ниже нормативных значений
 Олиготератозооспермия Общее число (или концентрация) сперматозоидов и процент морфологически-нормальных сперматозоидов ниже нормативных значений
 Олигозооспермия  Общее число (или концентрация) сперматозоидов ниже нормативных значений
 Тератозооспермия Процент морфологически-нормальных сперматозоидов ниже нормативных значений
Подсчет подвижности сперматозоидов в счетной камере Маклера
Подсчет сперматозоидов
Показано правило подсчета сперматозоидов в квадратах. Средняя из трех линий определяет границы квадрата (черная линия, левый рисунок). Подсчитывают все сперматозоиды внутри центрального квадрата, а также сперматозоиды, чьи жгутики находятся между двумя внутренними линиями (белые окружности), но не те клетки, головки которых располагаются между двумя внешними линиями (черные окружности). Сперматозоид, если большая часть его лежит на центральной линии, подсчитывают в случае, если эта линия находится ниже или левее квадрата (белые окружности, средний рисунок), но не выше или не справа квадрата (черные окружности, правый рисунок).

Морфология сперматозоидов

Методы приготовления мазков эякулята для оценки морфологии сперматозоидов.

Слева, метод получения мазка с помощью стекла, используемый для неразведенного эякулята. Каплю спермы наносят на предметное стекло, второе предметное стекло помещают под углом к первому, так чтобы эякулят растекался вдоль нижней границы второго предметного стекла. Затем второе стекло продвигается по плоскости первого для получения мазка.Справа метод с использованием пипетки для отмытых сперматозоидов. Каплю взвеси сперматозоидов размазывают по поверхности предметного стекла при помощи пипетки в горизонтальном положении.

Сокращения, используемые в комментариях к изображениям

Жизнеспособность сперматозоидаМазок, окрашенный эозин-никрозином, в световом микроскопе. Сперматозоиды с красными (D1) или темно-розовыми (D2) головками считаются мертвыми (повреждена менмбрана), при этом сперматозоиды с белыми (L) или светло-розовыми головками- живыми (с интактной мембраной).  

Морфология нормального сперматозоида.

Два изображения слева демонстрируют окрашенные по Шорру сперматозоиды, полученные из зоны пеллюцида ооцита in vitro. Изображение слева демонстрирует окрашенные по Папаниколау сперматозоиды, полученные из цервикальной слизи после коитуса. Наблюдается крайне мало дефектов на головке сперматозоида, шейке и концевой части. Жгутики могут быть закручены, но не сильно под углом.    
Схематическое изображение вариантов патологических форм сперматозоидов.

Портфолио 1

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 1

Портфолио 2

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 2

Портфолио 3

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 3

Портфолио 4

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 4

Портфолио 5

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 5

Портфолио 6

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 6

Портфолио 7

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 7

Портфолио 8

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 8

Портфолио 9

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 9

Портфолио 10

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 10

Портфолио 11

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 11

Портфолио 12

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 12

Портфолио 13

Морфологическая оценка сперматозоидов в портфолио 13
Агглютинация сперматозоидов.

Агрегация сперматозоидов

Микрофотографии сперматозоидов, которые агрегируют с:
  • эпителиальной клеткой (первое фото слева направо)
  • клеточным дебрисом (второе фото слева направо)
  • мертвыми сперматозоидами (третье и четвертое фото слева направо)

Морфологические изменения сперматозоида при гипоосмотическом стрессе.

a- Нет изменений b-g- Различные типы изменений жгутика. Набухание жгутика показано серым цветом.

«WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen fifth edition»

reproductologist.com

Сперматозоид под микроскопом - микроскопическое исследование спермы

Микроскопическое исследование спермы проводиться чаще всего для того чтобы выяснить причины бесплодия. Для этого мужчине назначают проведение спермограммы. Всемирной организацией здравоохранения издан специальный документ, где подробно освещаются все этапы исследования спермы от забора до момента утилизации. Анализ спермы. Многих интересует, при каком увеличении видны сперматозоиды. Чтобы провести изучение спермы под микроскопом необходимо настроить увеличение в 400 раз.

Специализация

Для исследования сперму необходимо как можно быстрее доставить в лабораторию. Желательно проводить изучение через тридцать минут после получения материала. Если внимательно рассмотреть сперматозоиды под увеличением, то можно заметить? что они отличаются друг от друга. Каждый вид сперматозоидов выполняет определённую функцию. Сперматозоиды годные для оплодотворения составляют один процент от общего объема. Это самые жизнеспособные клетки.

Большая часть сперматозоидов представлена клетками, которые получили от учёных название «киллеры». Они так же двигаются к клетке, но уничтожают другие сперматозоиды от другого партнера. Такие половые клетки имеют более крупную головку, в которой имеется яд, способный уничтожить чужие клетки. Когда учёные впервые наблюдали подобный процесс, они были потрясены. Одна такая специализированная клетка способна убить до десяти «чужаков». Клетка убийца, подойдя к сперматозоиду подлежащему уничтожению, выпускает ядовитые вещества.

Есть сперматозоиды роль которых сводится к обеспечению проникновения через стенки яйцеклетки оплодотворяющих сперматозоидов. Они истончают оболочку яйцеклетки. Ученые выделили ещё и третий вид сперматозоидов, они не двигаются к яйцеклетке. Их задача — не дать чужим клеткам участвовать в оплодотворении.

Критерии оценки

Подсчет спермограммы в камере Горяева позволяет узнать число сперматозоидов в эякуляте. Здесь же производится подсчёт лейкоцитов. При исследовании спермы определяется процентное отношение подвижных, неподвижных, и ограничено подвижных сперматозоидов. Для проведения анализа сперму наносят на стекло, переворачивают его таким образом, чтобы исследуемая капля попадала в лунку. Все процедуры проходят при комнатной температуре. С течением времени подвижность сперматозоидов уменьшается. Число клеток подсчитывается в 1 мл.

В норме количество сперматозоидов должно быть больше чем 150 млн. Камера Маклера является самым удобным инструментом, специально созданным для подсчёта сперматозоидов. Существует множество более дешевых аналогов данного прибора, но камера Маклера является более надежной. Самым важным показателем является соотношение нормальных и аномальных сперматозоидов. Если число последних значительно, то мужчина бесплоден.

Иногда при проведении электронно-микроскопического анализа выявляется такая патология как повреждение или отсутствие акросом. В сперматозоиде акросомы отвечают за выработку фермента, который позволяет гаметам проникать сквозь оболочку яйцеклетки. Серматозоид с такой аномалией не может проникнуть сквозь оболочку, и следовательно, оплодотворение не происходит.

Если в сперме обнаруживают кровь, то проводят комплексное обследование всей мочеполовой системы. В первую очередь на наличие патологии проверяют почки. Затем исключают заболевания мочевого пузыря и мочеточников. Обнаружить кровь в сперме можно визуально в том случае, если она изменила свой цвет. Сперма при разных заболеваниях может менять не только цвет, но и консистенцию.

ЭМИС

Ещё один метод исследования: ЭМИС — электронно-микроскопический анализ сперматозоидов. Спермограмма ЭМИС проводится с целью определить изменения, которые происходят со сперматозоидами. В первую очередь эти изменения затрагивают строение. При обычной спермограмме выявить нарушения в строении нет возможности.

Такая патология обычно является основной причиной бесплодия или неправильного развития эмбриона. Данный способ исследования позволяет выявить отклонения от нормы на генетическом уровне. Всего анализ проводится по сорока пяти параметрам. При этом обследовании изучается внутреннее строение клеток.

К примеру, исследуется состояние хвостика, который отвечает за движение половой клетки. Если он по какой-то причине отсутствует, сперматозоид остаётся неподвижным. Существуют определённые нормы, с которыми сравнивают полученные показания. Например, сперматозоидов с нормальной морфологией должны составлять около 30%.Сперматозоиды с возможностью совершать поступательные движения должны составлять от всего объёма 40%.

Ещё одной достаточно серьёзной патологией является незрелость хроматина. Хроматин — это материал, образованный из ДНК. У готового к оплодотворению сперматозоида он имеет высокую плотность. Если хроматин не достигает необходимого состояния, развитие зиготы происходит аномально, так как сперматозоид не может передать наследственную информацию в полном объеме.

Все генетические отклонения неизлечимы. Сперматозоид как любая клетка организма может быть поражён вирусной инфекцией или бактериями. Эти микроорганизмы препятствуют процессу оплодотворения яйцеклетки. Например, вирус герпеса может быть выявлен в сперматозоидах при проведении ЭМИС, при этом симптомы генитального герпеса не будут проявляться.

Подготовка

Для того чтобы анализы спермы отражали истинное положение дел, к их сдаче необходимо правильно подготовиться:

  • За семь суток до анализа рекомендовано половое воздержание.
  • За те же семь дней необходимо отказаться от приёма лекарственных препаратов.
  • Сперму необходимо собрать непосредственно перед проведением анализа, в контейнер. Временной промежуток между сдачей и исследованием не должен превышать один час.
  • При подготовке к анализу запрещено пить спиртные напитки, загорать, и париться в бане.

При нарушении данных правил результат будет искажён.

1ivf.info

Аналог камеры Маклера MMC-SR | Файловый клуб FilesClub.net

Чтобы посмотреть этот PDF файл с форматированием и разметкой, скачайте файл и откройте на своем компьютере.m m c soft счетная к аме ра Продажи: s y ur z [email protected] Юрженко Сергей Вячеславович www . mmcatalog . com Тел . /Viber/WhatsApp/Telegram: +7 - 952 - 201 - 6131 Skype: translator77 Камера для подсчета сперматозоидов MMC - S R Практичный и недорогой инструмент для оценки концентрации сперматозоидов (при использова- нии с анализатором ММС Сперм, также и по- движности) .  Основание из качественного полированного стекла . Камеру глубиной 10 ми крон образу- ет зазор между тремя круглыми опорами и покровным стеклом ( толщина 0,6мм ) .  На стеклянном днище нанесена сетка с ячейкой размером 100 x 100 микрон . Количе- ство сперматозо и дов в 10 квадратах счет- ного поля равно колич е ству в миллионах штук на 1 мл эякул я та.  Удобн ое круглое покровн о е стекл о , ящичек для хранения и транспортировки камеры.  В центр е камеры пипеткой помещается кап- ля исследуемого препарата и накрывается п о кровным стеклом. Есть канал для стека- ния и збытк ов жидкости. Преимущества:  Дешевле камер типа Ма клера.  Используется неразбавленный нативный материал.  Удобная прямоугольная форма основания: не нужно до- полнительных держателей, достаточно штатных держа- телей предметного столика микроскопа.  В отличие от камер Маклера и спользуются более деше- вые объективы с рабочим расстоянием от 0,6мм .  Сперматозоиды свободно движутся и располагаются в одной плоскости для удобства фокусировки.  В отличие от камер с капиллярным наполнением, не нужно ждать, пока материал распределится по кам е ре.  Износо устойчива я сетка .  Камера позволяет производить подсчет сперматозо и дов на недорогих микроскопах с фазовым контрастом. Не- смо тря на то, что объект поднимается выше обычного рабочего расстояния, с текля н ное основание улучшает настройку фазов ого контраст а .  Предназначена для подсчета концентрации спермат о зо- идов и других микроорганизмов в биожидкостях. Воз- можна примерная оценка подви жности спермат о зоидов (для более точной оценки используется спе р моанализа- тор ММС Сперм). m m c soft счетная к аме ра Продажи: s y ur z [email protected] Юрженко Сергей Вячеславович www . mmcatalog . com Тел . /Viber/WhatsApp/Telegram: +7 - 952 - 201 - 6131 Skype: translator77 Нагревательный столик MMC - SRH Для адекватного анализа подвижности спер- матозоидов в нативном эякуляте требуется поддерживать температуру 37°С как самого препара та, так и соприкасающегося с ним оборудования . При меньшей температуре подвижность сперматозоидов быстро падает, что приводит к искажению результатов ана- лиза. Для поддержания постоянн ой температуры можно использовать обычный нагреватель- ный столик, но мы на шли более эффектив- ное решение : н агревательный бокс для счетной камеры MMC - SR H . Преимущества :  Представляет собой специально сконструированный для использования со счетными камерами MMC - SR бокс, вы- полненный в размер камеры. Камера помещается внутрь для б ыстрого и равномерного прогрева.  Нагревательный столик MMC - SRH можно использовать как на микроскопе, так и отдельно – для предварительного подогрева перед анализом . Характеристики контроллера:  Входное напряжение 220В ±10%, AC45 - 60HZ .  Выходное напряжение 36 В, мощность 50Вт .  Цифровой дисплей для задания температурного режима.  Диапазон поддержания температурного режима: от ком- натной температуры до 70° С .  Точность поддержания температурного режима: ±0,5°С во всем диапазоне .

filesclub.net

Счетная камера — Традиция

Материал из свободной русской энциклопедии «Традиция»

Счётная камера - приспособление для подсчёта количества клеток при микроскопии, представляют собой предметное стекло с выгравированной на нём сеткой.

Виды счётных камер[править]

Существуют счетные камеры с различными типами сеток (Бюркера, Тома, Фукса-Розенталя, Нажотта, Нойбауэра, Предтеченского, Цейса, Горяева и др.), которые используют в зависимости от характеристик наиболее часто исследуемых объектов микроскопии.

Счетная камера Нойбауэра[править]

Счетная камера Горяева[править]

Сетка камеры Горяева имеет площадь 9 мм2 и состоит из 225 больших квадратов, из которых 25 разделены по вертикали и горизонтали на 16 малых квадратов. Площадь большого квадрата 1/25 мм2, площадь малого 1/400 мм2, глубина камеры 1/10 мм.

Счетная камера Тома[править]

Камера Тома используется только для подсчета тромбоцитов и эритроцитов. Имеет двойное сеточное деление, глубина ячейки 0,1 мм, Сеточное деление соответствует находящемуся в центре большому квадрату камеры Нойбауэра.

Счетная камера Бюркера[править]

Прибор для визуального подсчета клеток крови, сперматозоидов и т.п. под микроскопом, представляющий собой предметное стекло с углублением для крови и нанесенной на него сеткой для подсчета форменных элементов в единице объема крови. Глубина камеры, 10 мкм, в 10 раз меньше глубины обычной камеры для подсчёта клеток крови. Это делает камеру Бюркера самой неглубокой из известных камер. Конструктивно камера состоит из 2-х частей, выполненных из плоского оптического стекла. Верхняя часть служит в качестве покровного стекла и имеет сетку в центре с ячейкой 1 кв.мм, разделенной на 100 квадратов площадью 0,1х0,1 мм.

Счетная камера Маклера (Makler Sefi-Medical)[править]

Порядок использования[править]

Каплю разведённой крови из меланжера вносят под притёртое покровное стекло, После заполнения камеры кровью выжидают 2—3 мин, чтобы форменные элементы крови осели на дно камеры и движение их прекратилось. Считают все клетки, расположенные как внутри квадрата, так и на двух его сторонах (например, на верхней и левой). Эритроциты подсчитывают в 5 больших квадратах, расположенных по диагонали; лейкоциты — в 25 больших квадратах. Количество эритроцитов (лейкоцитов) в 1 мм3 определяют по формуле:

Х=(а+4000в)/с,

где Х — кол-во эритроцитов (лейкоцитов) в 1 мм3, а — кол-во подсчитанных клеток, в — степень разведения крови, с — кол-во малых квадратов, в которых произведён подсчёт.

Внешние ссылки[править]

traditio.wiki

Счетная камера — Традиция

Материал из свободной русской энциклопедии «Традиция»

Счётная камера - приспособление для подсчёта количества клеток при микроскопии, представляют собой предметное стекло с выгравированной на нём сеткой.

Виды счётных камер[править]

Существуют счетные камеры с различными типами сеток (Бюркера, Тома, Фукса-Розенталя, Нажотта, Нойбауэра, Предтеченского, Цейса, Горяева и др.), которые используют в зависимости от характеристик наиболее часто исследуемых объектов микроскопии.

Счетная камера Нойбауэра[править]

Счетная камера Горяева[править]

Сетка камеры Горяева имеет площадь 9 мм2 и состоит из 225 больших квадратов, из которых 25 разделены по вертикали и горизонтали на 16 малых квадратов. Площадь большого квадрата 1/25 мм2, площадь малого 1/400 мм2, глубина камеры 1/10 мм.

Счетная камера Тома[править]

Камера Тома используется только для подсчета тромбоцитов и эритроцитов. Имеет двойное сеточное деление, глубина ячейки 0,1 мм, Сеточное деление соответствует находящемуся в центре большому квадрату камеры Нойбауэра.

Счетная камера Бюркера[править]

Прибор для визуального подсчета клеток крови, сперматозоидов и т.п. под микроскопом, представляющий собой предметное стекло с углублением для крови и нанесенной на него сеткой для подсчета форменных элементов в единице объема крови. Глубина камеры, 10 мкм, в 10 раз меньше глубины обычной камеры для подсчёта клеток крови. Это делает камеру Бюркера самой неглубокой из известных камер. Конструктивно камера состоит из 2-х частей, выполненных из плоского оптического стекла. Верхняя часть служит в качестве покровного стекла и имеет сетку в центре с ячейкой 1 кв.мм, разделенной на 100 квадратов площадью 0,1х0,1 мм.

Счетная камера Маклера (Makler Sefi-Medical)[править]

Порядок использования[править]

Каплю разведённой крови из меланжера вносят под притёртое покровное стекло, После заполнения камеры кровью выжидают 2—3 мин, чтобы форменные элементы крови осели на дно камеры и движение их прекратилось. Считают все клетки, расположенные как внутри квадрата, так и на двух его сторонах (например, на верхней и левой). Эритроциты подсчитывают в 5 больших квадратах, расположенных по диагонали; лейкоциты — в 25 больших квадратах. Количество эритроцитов (лейкоцитов) в 1 мм3 определяют по формуле:

Х=(а+4000в)/с,

где Х — кол-во эритроцитов (лейкоцитов) в 1 мм3, а — кол-во подсчитанных клеток, в — степень разведения крови, с — кол-во малых квадратов, в которых произведён подсчёт.

Внешние ссылки[править]

traditio.wiki